生物堿中的極品----尼古丁的檢測方法開發(fā)思路分享
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時間 2025-06-09


尼古丁是一種生物堿,存在于茄科植物(包括煙草)中。生物堿是存在于自然界中的一類含氮的堿性有機化合物,有類似堿的性質(zhì)。例如麻黃堿、咖啡堿、阿托品等物質(zhì)都屬于生物堿。

人們在吸煙時吸入尼古丁,尼古丁被吸入后經(jīng)由血液傳送,通過血-腦脊液屏障,平均只需要10秒即可到達腦部,促使大腦產(chǎn)生令人感到愉悅和興奮的多巴胺及其他神經(jīng)遞質(zhì)。但這種作用很快就會消失,從而使吸煙者在不吸煙時產(chǎn)生煩躁不安、易怒等反應(yīng),隨之本能的渴望就是再次吸煙。所以客觀來講,吸煙容易上癮在很大程度上確實是尼古丁造成的。

尼古丁有一定的危害,但目前尼古丁的檢測方法還比較少。本文將提供一種尼古丁的檢測方法,并簡單分享方法開發(fā)的思路。



尼古丁的現(xiàn)有的檢測方法非常少。采用常規(guī)的C18柱進行分析,尼古丁在C18柱上保留非常弱,不利于定量。而在質(zhì)譜分析時,使用ESI源正模式,在酸性條件下,尼古丁的結(jié)構(gòu)帶上正電,則可以使用離子交換模式進行分析。


我們選擇月旭兩性離子色譜柱(選擇此色譜柱的原因見文末),并摸索實驗條件如下:


實驗條件

色譜柱:UItimate DLC UHPLC HILIC Amphion II(2.1×100mm,1.8μm)

流動相:A:10mmol/L甲酸銨溶液 B:乙腈

柱溫:30℃

流速:0.3mL/min

進樣量:5μL

色譜條件:

質(zhì)譜條件:

離子源:ESI+

檢測方式:MRM

干燥氣:氮氣,400℃

流速:1000L/Hr

碰撞氣:氬氣

離子噴霧電壓:3kV


譜圖


總結(jié)

在此條件下使用月旭UItimate DLC UHPLC HILIC Amphion II(2.1×100mm,1.8μm)色譜柱,可實現(xiàn)尼古丁的分析檢測,其保留時間、峰形均較好。由于尼古丁在實際樣品中屬于最難分析的一個成分,解決了尼古丁的檢測問題使樣品中其他成分的分離也迎刃而解。



最后,我們再來看看色譜柱的篩選過程。為什么兩性離子色譜柱很適合本項目?讓我們一起來看下。


HILIC Amphion II兩性離子色譜柱小檔案

● 適用于大多數(shù)極性化合物的分離,流動相一般用乙腈和水即可,不需要使用離子對試劑。

● 填料結(jié)構(gòu)同時含有陰陽離子,同時存在正電荷中心和負(fù)電荷中心,因而可以通過離子交換機制極大增強對酸堿化合物的保留。

● 具有很好的親水性,適合HILIC模式下分離極性、親水性的小分子或堿性化合物。